ERA技术：锁定疟原虫的“分子侦察兵”

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疟疾防控现状：全球挑战与中国应对

疟疾，一种由疟原虫引起的寄生虫病，通过某些类型的蚊子传播给人类的疾病，可危及生命，对全球公共卫生构成重大威胁。世界卫生组织数据显示，2022年全球85个国家报告疟疾病例2.49亿例，死亡60.8万例，热带地区和亚热带地区受影响最重(引用于《Develoment of an Enzymatic Recombinase Amplification Assay for the Rapid Detection of Plasmodium Nucleic Acids》）。2023年，全球83个国家估计有2.63亿例疟疾病例和59.7万例疟疾死亡；尽管世界卫生组织正式宣布中国已消除疟疾，但2023年输入性病例达2488例，较2022年激增194.4%，防控压力骤增。

传统检测手段存在明显短板：显微镜镜检依赖技师经验，对低密度感染漏诊率高；快速诊断试纸（RDT）对低密度感染敏感性不足；荧光定量PCR需专业实验室，检测周期长。这些局限使得快速、精准的新型诊断技术成为防控关键。

ERA技术：锁定疟原虫的“分子侦察兵”

1.技术原理：靶向保守基因的精准扩增

解放军总医院第五医学中心联合陆军军医大学团队，针对恶性疟原虫（P. falciparum）和间日疟原虫（P. vivax）的 18S rRNA 保守序列，设计特异性引物与探针，结合先达基因酶促重组酶扩增（ERA）技术，实现核酸高效等温扩增。在《Develoment of an Enzymatic Recombinase Amplification Assay for the Rapid Detection of Plasmodium Nucleic Acids》中，详细的和我们讲述了实验内容与结果。

2.技术实验流程：三步完成“从样本到结果”

（1）样本裂解

10μL全血与1mL裂解液混合，室温作用5分钟释放核酸；

（2）等温扩增

加入冻干微球试剂（含重组酶、DNA 聚合酶等），40℃孵育20分钟，核酸拷贝数呈指数级增长；

（3）荧光判读

紫外灯或便携仪器（GeneScope）下，荧光值≥1000判定为阳性，全程仅需25分钟。

3.核心性能：灵敏度与特异性双优

（1）灵敏度

检测限低至250拷贝 /mL，较荧光定量 PCR（10,000 拷贝 /mL）敏感40 倍；

（2）特异性

对巴贝斯虫、登革病毒等12种病原体无交叉反应，仅靶向疟原虫；

（3）稳定性

在反应体系中加入常见干扰物质（如药物、血红蛋白等），验证 ERA 的抗干扰能力。

（4）临床验证

75例临床样本中，ERA检测率94.54%（52/55），高于荧光定量PCR的 89.09%（49/55），且特异性达100%。

4.研究结果：ERA的现场检测优势

• ERA 检测方法：检测时间 25 分钟，温度要求 35-40℃，仪器需求为便携式荧光仪，检测限为 250 拷贝 /mL；
• 荧光定量 PCR 检测方法：检测时间 2 小时，温度要求为变温，仪器需求为实验室 PCR 仪，检测限为 10,000 拷贝 /mL；
• 检测方法：检测时间 15-30 分钟，温度要求为常温，无仪器需求，检测限约为 500 拷贝 /μL
  

ERA应用价值

该方法可快速、灵敏地检测恶性疟和间日疟，适用于疟疾筛查和临床诊断，尤其适合输入性病例监测和资源有限地区。与 RDT 相比，ERA 对低浓度感染的检测能力更强；与 PCR 相比，操作更简便，无需复杂仪器。

1.冻干微球工艺

试剂常温稳定，突破冷链运输限制，适合偏远地区储备；

2.“一锅法”设计

无需核酸提取，全血直接检测，减少操作步骤与污染风险；

3.便携设备配套

GE4 仅巴掌大小，现场实时读取数据；

4.多场景适用性

可用于临床诊断、边境筛查、旅行者自检等场景，尤其适合低资源地区。

技术加持与防控呼吁

当 “输入性疟疾” 成为新挑战，我们需要更高效的 “侦察兵”。开发了针对疟原虫的 “一锅法” ERA 检测体系，填补了该技术在疟原虫检测中的应用空白。验证了 ERA 在临床样本中的高效表现，为疟疾现场快速检测提供了新工具。

消除疟疾的征程中，技术创新是阻断传播的关键一环。ERA 检测技术的临床转化，正为全球疟疾防控网络添补一块重要拼图，助力实现 “早发现、早治疗、早控制” 的目标。