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[分享] 什么是生化检测?

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发表于 2025-2-18 21:08 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2025-2-18 21:08 | 显示全部楼层
生化检验员


01职业技能介绍

生化检验员职业编码为6-31-03-03,职业技能等级资格。使用检测仪器和设备,对农业、发酵、食品、纺织、制药、皮革等生产过程中的生物化学物质进行生化检验人员。职业标准(试行)是由人社部在2024年发布
本职业共设五个等级,分别为:五级/初级工、四级/中级工、三级/高级工、二级/技师、一级/高级技师。
一般职业技能实行逐级晋升制,该职业报考对应专业职称作用明显,直接跳过四级,初级职称满一年直接报考三级,中级职称满一年可以直接报考二级,高级职称满一年直接报考一级。学历优势展现明显,本专业大专生可以直接报考三级。
02职业技能报考及考核

一、报名
培训机构的选择可以登录技能人才工作评价网查询,机构证书效力相同,方便就近选择低价机构。技能人才工作评价网隶属人社部,提供技能查询、证书查询、技能职业标准查询备案培训机构查询等。




选择机构时应注意的事项:
1.备案时限,查看备案是否到期,否则影响培训证书发放。
2.认定的对象,划分为面向社会、面向在校生、面向本单位,社会人员报考选择面向社会。
3.考核级别,机构具备的考核级别是否涵盖全部,技能等级有严格的晋升机制,只有拥有低级别证书和对应的从业年限后方可晋升。
4.等级证书,经备案后培训机构的证书,人社部有明确的证书样板规定。如下:


二、报考条件
具备以下条件之一者,可申报五级/初级工:

  • 年满16周岁,拟从事本职业或相关职业工作。
  • 年满16周岁,从事本职业或相关职业工作。
具备以下条件之一者,可申报四级/中级工:

  • 累计从事本职业或相关职业工作满5年。
  • 取得本职业或相关职业五级/初级工职业资格(职业技能等级)证书后,累计从事本职业或相关职业工作满3年。
  • 取得本专业或相关专业的技工院校或中等及以上职业院校、专科及以上普通高等学校毕业证书(含在读应届毕业生)。
具备以下条件之一者,可申报三级/高级工:

  • 累计从事本职业或相关职业工作满10年。
  • 取得本职业或相关职业四级/中级工职业资格(职业技能等级)证书后,累计从事本职业或相关职业工作满4年。
  • 取得符合专业对应关系的初级职称(专业技术人员职业资格)后,累计从事本职业或相关职业工作满1年。
  • 取得本专业或相关专业的技工院校高级工班及以上毕业证书(含在读应届毕业生)。
  • 取得本职业或相关职业四级/中级工职业资格(职业技能等级)证书,并取得高等职业学校、专科及以上普通高等学校本专业或相关专业毕业证书(含在读应届毕业生)。
  • 取得经评估论证的高等职业学校、专科及以上普通高等学校本专业或相关专业的毕业证书(含在读应届毕业生)。
具备以下条件之一者,可申报二级/技师:

  • 取得本职业或相关职业三级/高级工职业资格(职业技能等级)证书后,累计从事本职业或相关职业工作满5年。
  • 取得符合专业对应关系的初级职称(专业技术人员职业资格)后,累计从事本职业或相关职业工作满5年,并在取得本职业或相关职业三级/高级工职业资格(职业技能等级)证书后,从事本职业或相关职业工作满1年。
  • 取得符合专业对应关系的中级职称(专业技术人员职业资格)后,累计从事本职业或相关职业工作满1年。
  • 取得本职业或相关职业三级/高级工职业资格(职业技能等级)证书的高级技工学校、技师学院毕业生,累计从事本职业或相关职业工作满2年。
  • 取得本职业或相关职业三级/高级工职业资格(职业技能等级)证书满2年的技师学院预备技师班、技师班学生。
具备以下条件之一者,可申报一级/高级技师:

  • 取得本职业或相关职业二级/技师职业资格(职业技能等级)证书后,累计从事本职业或相关职业工作满5年。
  • 取得符合专业对应关系的中级职称后,累计从事本职业或相关职业工作满5年,并在取得本职业或相关职业二级/技师职业资格(职业技能等级)证书后,从事本职业或相关职业工作满1年。
  • 取得符合专业对应关系的高级职称(专业技术人员职业资格)后,累计从事本职业或相关职业工作满1年。
三、考核内容及方式
培训学时要求:五级/初级工不少于180标准学时;四级/中级工不少于140标准学时;三级/高级工不少于100标准学时;二级/技师、一级/高级技师不少于80标准学时。
考核分为理论知识考试、技能考核以及综合评审。理论知识考试以笔试、机考等方式为主,主要考核从业人员从事本职业应掌握的基本要求和相关知识要求;操作技能考核主要采用现场操作、模拟操作等方式进行,主要考核从业人员从事本职业应具备的技能水平;综合评审主要针对二级/技师和一级/高级技师,通常采取审阅申报材料、答辩等方式进行全面评议和审查。
理论知识考试、操作技能考核和综合评审均实行百分制,成绩皆达60分(含)以上为合格。标准中五级工、四级工标注“★”的为涉及安全生产或操作的关键技能,如考生在操作技能考核中违反操作规程或未达到该技能要求的,则操作技能考核成绩为不合格。
理论知识考试时间不少于90min,操作技能考核时间不少于40min,综合评审时间不少于20min。




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发表于 2025-2-18 21:09 | 显示全部楼层
一、常见肾功检测指标

       肾功能检测在医学领域具有极其重要的地位,它主要用于评估肾脏的功能状态,帮助医生诊断肾脏疾病、制定治疗方案以及监测疾病进展;主要是肌酐、尿素氮、胱抑素C尿酸、尿微量白蛋白等;
       肾脏功能包括肾小球的滤过功能、肾小管的重吸收及分泌功能,血中肌酐和尿素氮通过肾小球滤过进入尿液排出体外,因此血清尿素氮、肌酐是评价肾脏滤过功能的指标。血清尿素氮首先被作为肾功能的评价指标,但它不符合肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)标志物的要求,当GFR减少到正常值的40%以前,尿素氮浓度升高缓慢,并且与外源性(蛋白质摄入量)与内源性(感染、肾上腺皮质激素的应用、胃肠出血等)尿素负荷的大小有关,更重要的是肾小管对尿素氮有明显的被动重吸收性。肌酐基本符合内源性GFR标志物的要求,国内外仍用血清肌酐作为临床常规评估肾小球滤过功能受损的指标.但只有当GFR下降1/3~1/2时.血清肌酐才有明显变化,而且受性别、饮食、肌肉量等因素的影响。因此,尿素氮、肌酐都不是评价肾功能的理想指标。 血浆胱抑素C的含量较稳定,不易受其它因素的影响,它的浓度不但不受年龄、性别、肌肉量等因素的影响,而且也不受大多数药物以及炎症的影响,所以一般来说,该指标相比于肌酐或者尿素氮来说更加理想。接下来我们一起揭开这些指标的神秘面纱;
1.尿素氮/尿素(BUN/UA)
       尿素氮(血尿素氮)是蛋白质代谢的终末产物,是属于机体代谢废物,在肝脏中合成,主要由肾脏排泄。在肾功能正常的情况下,会从肾小球滤出,当肾小球滤过功能减低时,尿素氮因滞留在血液中而增高,故可用作肾小球滤过功能的诊断和过筛指标,正常成人空腹尿素氮为3.2~7.1mmol/L(9~20mg/dl)。
       在肾功能损害早期,血尿素氮可在正常范围。当肾小球滤过率下降到正常的50%以下时,血尿素氮的浓度才迅速升高。所以尿素和肌酐的指标在正常范围内,并不意味着肾脏没有损害。
       正常情况下,血尿素氮与肌酐之比(BUN/Scr)值约为10,高蛋白饮食、高分解代谢状态(感染,肠道出血、甲亢等)、缺水、肾缺血、血容量不足、应用肾上腺皮质类固醇药物及某些急性肾小球肾炎,均可使比值增高,甚至可达20~30;而低蛋白饮食,肝疾病常使比值降低,此时可称为低氮质血症。各种肾实质性病变,如肾小球肾炎、间质性肾炎、急慢性肾功能衰竭、肾内占位性和破坏性病变均可使血尿素氮增高。但该指标对于诊断疾病类型意义不大,若出现异常,应做进一步的检查。
BUN与UREA换算公式为: BUN<mg/dL>x2.144= Urea<mgdL>
偏高病因
器质性肾功能损害
⑴ 各种原发性肾小球肾炎肾盂肾炎间质性肾炎肾肿瘤、多囊肾等所致的慢性肾衰竭
急性肾衰竭肾功能轻度受损时,BUN可无变化,但GFR(肾小球滤过率)下降至50%以下,BUN才能升高。因此血BUN测定不能作为早期肾功能指标。但对慢性肾衰竭,尤其是尿毒症BUN增高的程度一般与病情严重程一致:肾衰竭代偿期GFR下降至50ml/min,血BUN〈9mmol/L;肾衰竭失代偿期,血BUN〉9mmol/L;肾衰竭期,血BUN〉20mmol/L。
② 肾前性少尿
       如严重脱水、大量腹水、心脏循环功能衰竭、肝肾综合征等导致的血容量不足、肾血流量减少灌注不足导致少尿。此时BUN升高,但肌酐升高不明显,BUN/Cr(mg/dl)〉10:1,称为肾前性氮质血症。经扩容尿量多能增加,BUN可自行下降。
③ 蛋白质分解或摄入过多
       如急性传染病、高热、上消化道大出血、大面积烧伤、严重创伤、大手术后和甲状腺功能亢、高蛋白饮食等,但血肌酐一般不升高。以上情况矫正后,血BUN可以下降。
       血肌酐〈Scr〉和尿素氮〈BuN〉两者分别为含氮的有机物和蛋白质代谢的终末产物,在肾功能正常的情况下,这些小分子物质从肾小球滤出,故可用作肾小球滤过功能的诊断和过筛指标。当肾小球滤过功能减低时,血肌酐和尿素氮 因潴留而增高。
偏低病因
肾功能失调
        尿素氮偏低,可能与蛋白质吃得太少、怀孕、肝衰竭有关。
肝功能衰竭
       肝脏是人体重要的代谢器官,肝功能衰竭,造成营养物质不能正常吸收。另一个原因是患者蛋白质摄入不够,再加上因肝功能不正常而大量消耗。
2.肌酐(Cr,CREA)

      肌酐来源于骨骼肌中肌酸的代谢及膳食中肉类的摄入,它以相对恒定的速率释放进循环中,肌酐可自由通过肾小球滤过,而不被肾脏重吸收及代谢,每日体内产生的肌酐,几乎全部随尿液排出,一般不受尿液量的影响。因此在临床上检测血肌酐是常用的了解肾功能的主要方法之一。
     按照检测部位来看:肌酐检测可分为血肌酐和尿肌酐,临床上常用检测血肌酐来了解肾脏功能。一般来说血肌酐正常值标准可参考如下:男性53~106μmol/L;女性44~97μmol/L;儿童:24.9~69.7μmol/L。
     按照来源来看:血肌酐分为内生肌酐和外源性肌酐。内生肌酐是由身体内肌肉代谢产生的,而外源性肌酐,顾名思义,就是从外面摄入的肉类食物产生的肌酐。在肉类食物摄入量较稳定,身体的肌肉代谢又没有大的变化时,肌酐的生成就会比较恒定。
      血肌酐的参考区间上限为100μmol/L左右。当肾功能有了损害,肾小球的滤过率降低,血肌酐的排出受阻,因此数值就会增高,但是血肌酐数值并不能及时、准确地反映肾功能状况,只有当人体肾脏的大部分遭受病理损伤,肾小球滤过率下降比例较大时(超过50%),血肌酐值才会出现升高的情况。
3.内生肌酐清除率(CCr)

     尿素氮和血肌酐评价肾功能也存在不足之处,比如肾功能早期,尿素氮和血肌酐就不一定会升高,还有就是两者比较容易受到其他因素的影响,尤其是尿素氮。比如在高蛋白饮食、消化道出血、感染、脱水、口服激素等药物之后,也容易出现升高。
      反映肾功能目前比较准确的指标为内生肌酐清除率(CCr)是指内生肌酐随尿液排出体外的速率,它是判断肾小球损害的敏感指标。
      内生肌酐清除率(CCr)来反映肾小球滤过率(GFR),即肾脏在单位时间内将多少量血浆中的肌酐全部清除而由尿液排除。CCr的计算公式有多种,如CCr=(尿CREA×尿液体积/血CREA)×(1.73/实际体表面积)等。
     正常成人的内生肌酐清除率范围在每分钟80~120ml。
      成人内生肌酐清除率低于每分钟80ml时则表明肾小球滤过功能减退;若减至每分钟70~51ml为轻度损害;降至每分钟50~31ml为中度损害;减至每分钟30ml以下,为重度损害;减至每分钟20~10ml为早期肾功能不全,对慢性肾炎患者提示预后不良;减至每分钟10~5ml为晚期肾功能不全;每分钟小于5ml,为终末期肾功能不全。
4.尿微量白蛋白(UMA)

       白蛋白是重要的血浆蛋白质之一,在正常情况下,白蛋白的分子量大,不能透过肾小球基底膜,因此健康人尿液中仅含有浓度很低的白蛋白,具体到尿白蛋白不超过20mg/L,所以又被称为“尿微量白蛋白”。
       若有肾脏疾病时,肾小球基膜受到损害,这个时候白蛋白即可透过基底膜进入尿液中,尿白蛋白浓度即可出现持续升高。尿微量白蛋白是早期诊断肾功能变化最敏感、最可靠的指标。如果在体检后发现尿微量白蛋白在20~200mg/L 范围内,就属于微量白蛋白尿,如果患者能够及时就医,规范治疗,尚可彻底修复肾小球,消除蛋白尿。而当尿中微量白蛋白超过200mg/L 时,就应该引起注意了,此时证明肾病患者已有大量白蛋白漏出,可能出现低蛋白血症,尿常规测试尿蛋白阳性(+)~(+++),如果不及时进行医治,就会进入尿毒症期。
    微量白蛋白尿是糖尿病肾病早期的临床证据,尤其是对于高血压以及2型糖尿病患者,进行尿微量白蛋白的筛查十分必要。测定尿白蛋白最理想的方法是留取24小时尿标本。由于尿白蛋白的排泄量存在较大程度的变异,所以未定时的尿液标本(随意尿)一次白蛋白排泄量增加,可能并无意义,连续2~3次增高才有诊断价值。
5.尿酸(UA)

       尿酸是我们人体嘌呤代谢的最终产物,2/3的尿酸是我们肾脏排泄。正常情况下,人体内每天生成的尿酸与排出的尿酸量持平,因此人体内的尿酸含量也相对稳定。
      参考区间分男女,男:149~416umol/L,女:89~357umo1/L。
     有些原因会导致尿酸的增多,但是尿酸高不等于痛风。由高尿酸发展到痛风一般需要十年左右的时间。出现了高尿酸,如果是病理性的,要及时就医,解除病因;还有些是一过性的高尿酸血症,此时要注意少吃海鲜、动物内脏等高嘌呤的食物,平时也要注意多饮水,少量多次,促进尿酸的排出。
6.胱抑素C(Cystatin C,Cys C)

       胱抑素(cystatin c)是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白,广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质,分子量为13.3KD,由122个氨基酸残基组成,编码基因属于管家基因,能在所有的有核细胞内以恒定速度持续转录与表达,无组织特异性,故 Cys C 可在体内以恒定速度产生,并存在于各种体液之中,不受年龄、性别、体重、炎症等因素影响。循环中的胱抑素 C仅经肾小球滤过而被清除,并在近曲小管重吸收,但重吸收后被完全代谢分解,不返回血液,因此,其血中浓度由肾小球滤过率决定,而不依赖任何外来因素,如性别、年龄、饮食的影响,是一种反映肾小球滤过率变化的理想内源性标志物。该指标性能优于肌酐,特别是在肾功能仅轻度减退时,敏感性高于血肌酐,被认为是判断肾小球功能的首选指标。  
       正常情况下,Cys-C在血清和血浆中的浓度为0.51-1.09mg/L (参考范围)。  当肾功能受损时,Cys-C在血液中的浓度随肾小球滤过率变化而变化  。肾衰时, 肾小球滤过率下降,Cys-C在血液中浓度可增加10多倍; 若肾小球滤过率正常,而肾小管功能失常时,会阻碍Cys-C  在肾小管吸收并迅速分解,使尿中的浓度增加100多倍。



胱抑素C与其它肾小球滤过率(GFR) 检测内源性标志物对比

二、其它指标:

1.β2-微球蛋白(β2-MG)

① β2-微球蛋白是由淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生的一种小分子球蛋白,广泛存在于血浆、尿液、脑脊液、唾液以及初乳中。正常人β2-微球蛋白的合成率及从细胞膜上的释放量相当恒定。β2-微球蛋白可以从肾小球自由滤过,99.9%在近端肾小管吸收,并在肾小管上皮细胞中分解破坏,故而正常情况下β2-微球蛋白的排出是很微量的。
② 大部分情况下,血清β2-微球蛋白的升高可反映肾小球滤过功能受损或滤过负荷是否增加的情况;而尿液中排出β2-微球蛋白增高,则提示肾小管损害或滤过负荷增加。
③ 在急慢性肾盂肾炎时,因肾脏受损,故尿β2-微球蛋白升高,而膀胱炎患者则β2-微球蛋白正常。
④ 肾移植患者血、尿β2—微球蛋白明显增高,提示机体发生排斥反应,一般在移植后2~3天血β2—微球蛋白上升至高峰,随后逐渐下降。肾移植后连续测定血、尿β2—微球蛋白可作为肾小球和肾小管病变的敏感指标。
⑤ 尿β-微球蛋白测定也有助于鉴别上、下尿路感染。上尿路感染易影响肾小管对分子蛋白质的再吸收,尿β2微球蛋白升高,而下尿路感染尿β2微球蛋白不会升高。
⑥ 测定主要用于监测近端肾小管的功能。在急性肾小管损伤或坏死、慢性间质性肾炎、慢性肾衰等情况下,均可使得尿β2—MG显著升高。肾移植患者血、尿β2—MG明显增高,提示机体发生排异反应;肾移植后连续测定β2—MG可作为评价肾小球和肾小管功能的敏感指标。糖尿病肾病早期有肾小管功能改变,尿β2—G也会升高。
⑦ 在系统性红斑狼疮活动期,造血系统恶性肿瘤,如慢性淋巴细胞性白血病时,尿液β2—MG也有升高。可以和血液β2—微球蛋白共同测定,共同用于上述疾病的诊断。
2.α1微球蛋白(α1-MG)

① α1-MG是由人体的肝脏和淋巴细胞合成的糖蛋白,广泛存在于人体各种体液及淋巴细胞膜表面。血液中的α1-MG以两种形式存在,即游离的α1-MG和与IgA结合的α1-MG(α1MG-1gA)。正常情况下,α1MG-1gA约占血液中总α1-MG的40一70%,血液中免疫球蛋白水平对α1-MG及α1MG-1gA之间的比例有影响。血液中游离的α1-MG可自由通过肾小球滤过膜,95%-99%在肾近曲小管重吸收和代谢,只有微量从终尿排出;而结合型的α1-MG则不能通过肾小球,其在尿液中的浓度为零。
② 一般认为α1-MG在血清及尿液中增高的原因有:
a.肾小管重吸收和代谢α1-MG的能力降低;
b.肾小球滤过功能受损;
c.体内合成过多;
d.淋巴细胞破坏释放。
目前人们普遍认为血清及尿液中α1-MG的测定可作为反应肾小管重吸收功能受损的一项灵敏指标,而且在某种程度上还优于 β2-微球蛋白
③ 不同的方法测定的α1-MG值有所差别,而相同的方法在不同的实验室条件下所测定的结果则大同小异。血清中α1-MG浓度不但存在性别差异,而且有年龄之不同,已知婴儿脐带血中α1-MG含量比正常成人高,可能与小儿淋巴细胞含量比正常人相对较高有关。
④ 导致升高的疾病:
(1)各种肾病导致的肾功能不全,如肾小球损伤早期、原发性肾小球肾炎、间质性肾炎、糖尿病肾病、狼疮肾、急慢性肾功能衰竭等。
(2)也见于IgA型骨髓瘤、肝癌等。
降低:提示重度肝功能损害,见于肝病患者。
3.视黄醇结合蛋白

① 视黄醇结合蛋白(Retinol-Binding Protein,RBP)是血液中维生素A的特异转运蛋白,由肝脏合成,广泛分布于血液、脑脊液、尿液及其他体液中。测定视黄醇结合蛋白能早期发现肾小管的功能损害,并能灵敏反映肾近曲小管的损害程度,可作为肾功能早期损害和监护治疗的指标,还可作为肝功能早期损害和监护治疗的指标。
② 当肾脏疾病发生时,由于肾小球滤过率下降,肾小管重吸收障碍,血清和尿液中RBP 均显著增高。在糖尿病肾病、高血压肾病等引起肾小球滤过率(GFR)或肾血流量降低时,RBP 的滤过率也相应减少,因而致使血液中RBP 蓄积而浓度增高。而其他慢性肾病患者尿中出现管状蛋白尿亦可引起血液中RBP 升高,早期比肌酐、尿素氮更敏感,而且不受饮食的干扰影响。
③ 除肾脏外,因RBP 在肝脏内合成,当肝脏受各种因素损害后,RBP 的合成功能降低,反映在血液中RBP 水平的下降,同时,RBP的半衰期较前白蛋白更短,故更能早期敏感地反映肝脏的合成功能与分解代谢的变化
④ RBP 在生理上,半衰期很短(3~12h),生物特异性高,许多临床疾病都能影响RBP 微循环量,所以血浆RBP水平经常作为临床营养状况评价的指标,用来特异地诊断早期营养不良。
4. 电解质:

通常包括:钠(Na),钾(K),氯(Cl)。

  • 钠的正常范围:135-145mmol/L。
  • 钾的正常范围:3.5-5.5mmol/L。
  • 氯的正常范围:98~106 mmol/L。
这些电解质对于维持生命活动都是非常重要的,比如说钠是细胞外液中带正电的主要离子,可以调节体内水分与渗透压,此外,糖代谢、氧的利用也需有钠的参与。钠、钾、氯都属于小分子物质,正常情况下都可以由肾脏进行排泄,以维持体内电解质的稳定。
当肾功能出现问题时可出现电解质紊乱,比如高钾血症,就是人体的一种危重症,高钾会使心肌受抑,心肌张力减低,导致心脏骤停、引起猝死!


三、尿液样本留取方式

① 尿液标本留取类型及方式
用于尿白蛋白检测的标本包括时段尿(如24h尿、12h尿)、晨尿、随机尿。但由于个体内变异较大,随机尿白蛋白检测通常用尿肌酐进行校正。晨尿是临床较为常用的一种标本类型,相比于随机尿,受到饮水和生理活动的影响较小。但对于夜尿增多的患者,晨尿的生理变异仍较大。
② 报告方式
尿白蛋白检测报告方式主要有3种,即尿白蛋白浓度(UAC,单位为mg/L)、尿白蛋白排泄率(UAER,单位为μg/min)、尿白蛋白与肌酐比值(ACR,单位为mg/mmol、mg/g 或μg/mg)。但鉴于标本留取的方便性,临床上多采用检测晨尿或随机尿标本的尿白蛋白与肌酐比值(ACR)。只是单次检测结果异常并不能诊断患有慢性肾脏病(CKD)。推荐3~6个月内至少采集3次标本,有2次以上的ACR 检测结果>30mg/g 方可诊断CKD。
③ 临界值的设定
ACR>30mg/g 常被作为糖尿病肾病(DKD)的临界值。若ACR<30mg/g 定义为尿白蛋白排泄正常至轻度增加,30~300mg/g 定义为中度增加,>300mg/g 定义为重度增加,用于慢性肾脏病的分期与预后分层。
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发表于 2025-2-18 21:09 | 显示全部楼层
作为一个每天都在和生化分析仪打交道的研发人员,太能回答这个问题了
1、定义
生化检测是指以生化手段定性、定量地分析酶、蛋白质及其代谢产物的一种分析方法,是最常用的体外诊断测试方法,常见的测试项目包括肝功、肾功、血脂、血糖、葡萄糖等。
2、常用的工具及原理
生化检测通过生化分析仪来完成检测,生化分析仪是一种利用光学检测原理来实现检测的仪器。其原理为朗伯比尔定律:
比尔—朗伯定律数学表达式
A=lg(1/T)=Kbc
A为吸光度,T为透射比(透光度),是出射光强度(I)比入射光强度(I0).
K为摩尔吸光系数.它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关.
c为吸光物质的浓度,单位为mol/L,b为吸收层厚度,单位为
朗伯比尔定律的应用需要满足几个条件:

  • 光线为平行光;
  • 光线为单色光;
  • 溶液介质均匀;
为了实现单色光,常用的分光方式包括滤光片前分光、分光片后分光、光栅分光,在中速及高速生化分析仪上,采用光栅+狭缝的分光方式。
全自动生化分析仪经过多年的发展,从半自动、100速全自动、400速全自动、800速全自动,到现在的2000速全自动生化分析仪。虽然速度和自动化程度在不断提升,但其本质的检测原理并未发生变化,内部的光学核心部件仍然是分光光度计。
随着应用场景的多样化,生化检测也出现了POCT的产品,如微流控盘式生化,干式生化分析仪等。
3、生化检测的操作步骤

  • 参数设置   生化检测首选需要对所测试的项目根据项目说明书的要求进行参数设置,包括加样量、加试剂量、读点数、分析方法、线性范围等;
  • 加载试剂   通过手工录入或条码扫描的方式在试剂盘中放入试剂,并在试剂系统中录入所放试剂的试剂信息。
  • 校准   通过已知浓度的样本,测试生成校准曲线,校准是生化分析仪不可缺少的步骤。
  • 质控   每天对质控品进行测试,测试结果需在规定范围内,通过质控可以及时了解仪器及试剂的状态,有效保证样本测试结果的准确性。
  • 样本测试   确定了仪器和试剂状态后,即可开展样本测试,上样前需要观察样本中是否有凝块,黄疸,溶血等,这些因素将影响测试结果的准确性。
  • 审核、打印报告或上传LIS。
至此,即完成了一个样本的测试工作。
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发表于 2025-2-18 21:09 | 显示全部楼层
生化检验原理 :朗伯—比尔定律待测物质溶液(均匀非散射)在一定浓度范围内对一定波长的单色平行光的吸光度与被测物质浓度和溶液厚度成正比。数学式为:A= εCL
中A为吸光度,C浓度,L为光径, ε为摩尔吸光系数,单位是L/mol∙cm,指浓度为1 mol/L,吸收池厚为1cm,以一定波长的光通过时,所引起的吸光度值A。
ε值取决于入射光的波长和吸光物质的吸光特性,亦受溶剂和温度、PH值的影响。显然,ε值愈大,灵敏度就愈高。
关注我 @学医的你怕不怕 ,你就多了一个在医检行业能和你聊天的朋友。


生化仪器的分析方法
1.终点法:
被测物质在反应过程中完全被转变为产物,到达反应终点,根据终点吸光度的变化求出被测物浓度,称为终点法。
2.固定时间法
指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点,此两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度,测定单位时间内两点的吸光度的变化率。有时也称此法为两点法。
3.动力学法
用于酶活力的测定,连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间的变化情况,在反应速度恒定的情况下,以单位时间酶反应初速度来计算酶的活力单位。此法测酶的活力而不是酶的浓度(质量)。
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发表于 2025-2-18 21:10 | 显示全部楼层
生化检测又称临床化学,是在研究人体健康和疾病的生物化学过程变化的基础上,利用物理学、化学、生物学、病理学、免疫学、生物化学的理论与技术,通过检测人体血液、尿液、脑脊液等样本中化学物质的量与质的变化,为临床医生或研究者提供疾病诊断、病情监测、疗效观察、判断预后以及健康评价等信息,最终判断被检者是否存在潜在疾病或排除某些疾病、揭示疾病变化以及药物治疗对机体生物化学过程影响的一门学科。
在临床上,我们的医学检验就经常要用到生化检测,而在科研方面,生化检测更是为物质含量测定、酶活力快速检测、药物研发等方面提供各种便捷。
生化检测的发展历程:
1904年,Folin用目视比色的方法测定肌酐;
20世纪30年代,光电比色计法出现;
20世纪50年代,分析技术如离心、层析、电泳、免疫分析、光谱分析、电化学发光等技术出现;
20世纪70年代,放射免疫分析技术、化学发光技术和电化学发光技术快速发展;
20世纪80年代,聚合酶链反应(PCR)将生物化学检验与分子生物学检验向前推进了一大步;
20世纪90年代,生物芯片技术飞速发展;
21世纪,酶学分析技术建立,为生物化学的快速化、特异化奠定了基础。
生化检测的检测原理:
生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示:




延迟区:无规律可寻。等速区:对应的是速率法,一般应用于酶类项目,可以使用因数法来计算待测浓度。
过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。
平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。
某物质与显色剂反应后,形成区别于自身的颜色反应,在某一波长下,吸光度的强弱与物质的含量呈正比关系,其显色反应的示意图如下:


生化检测可以检测的样本类型的:
体液:血清(浆)、尿液、唾液等
组织:动植物组织
食品:果汁、蜂蜜、牛奶、红酒、巧克力等
其它:保健品、化妆品
人体生化检测的检查内容包括:
肝功能(总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比,总胆红素、直接、间接胆红素,转氨酶);血脂(总胆固醇,甘油三酯,高、低密度脂蛋白,载脂蛋白);空腹血糖;肾功能(肌酐、尿素氮);尿酸;乳酸脱氢酶;肌酸肌酶等。
人体生化检测的检查项目有:
1.血清丙氨酸氨基转移酶测定生化全套检查
2.血清天门冬氨酰基转移酶测定
3.血清γ--谷氨酰基转移酶测定
4.血清碱性磷酸酶
5.血清白蛋白测定
6.血清白蛋白测定
7.球蛋白A/G/M
8.A/G
9.血清总胆红素测定
10.血清直接胆红素测定
11.血清间接胆红素测定
12.血清前白蛋白测定
13.ALT/AST
14.血清总胆固醇测定
15.血清甘油三酯测定
16.血清高密度脂蛋白胆固醇测定
17.血清低密度脂蛋白胆固醇测定
18.血清载脂蛋白A1测定
19.血清载脂蛋白B测定
20.血清载脂蛋白a测定
21.尿酸测定
22.肌酐测定
23.尿素测定
24.血清碳酸氢盐测定
25.乳酸脱氢酶测定
26.血清肌酸激酶
27.血清肌酸激酶-MB同功酶活性测定
28.血清a羟基丁酸脱氢酶测定
29.钾测定
30.钠测定
31.氯测定
32.钙测定
33.葡萄糖测定
34.胱抑素
35.C反应蛋白
36.核苷酸酶
.......
以上。

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