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生化分析仪检测原理
一、光电比色法原理
生化分析仪利用光电比色法进行检测,其基本结构由光源、滤光片、比色皿、光电检测器、放大和显示等六部分组成。原理如下:
光源发出复合光,经滤光片滤除后变为近似的单色光。此单色光通过盛放样品液的比色皿时,部分被样品液吸收,剩余光线照在光电检测器上。光电检测器将光信号强弱转变为电信号大小,再根据设定的测定方法(如速率法、终点法、固定时间法等)选取相应的吸光度值或吸光度变化率用于计算,最后由显示部分输出测量结果。吸光度是光线通过溶液或物质前的入射光强度与通过后的透射光强度比值的对数,受溶剂、浓度、温度等因素影响,根据比尔定律,吸光度A=吸光系数××吸收介质的厚度××吸收介质的浓度c。
二、不同检测方法原理
(一)终点法原理
- 原理:反应混合物在反应一定时间后达到平衡(终点),当显色反应处于稳定阶段时,检测其颜色对光子的吸收强度,从而计算出待测物质的浓度。
- 类型及项目:包括单波长和双波长终点法、比色法和比浊法、一点终点法和两点终点法(即固定时间法)。主要检测项目有总蛋白、白蛋白、葡萄糖氧化酶、肌酐、特殊蛋白和部分药物监测。
(二)速率法原理
- 原理:在酶促反应的最佳条件下,利用物理、化学或酶学分析方法,连续观察和记录一定反应时间内底物或产物的变化,计算单位时间内酶促反应初始速率下酶活性的大小和代谢产物的浓度。
- 类型及项目:包括两点速率法和多点速率法,主要适用于酶活性和代谢产物的检测。2
(三)电极法原理
- 原理:基于离子选择电极和参比电极的电位测量。在电解质中,大多数盐被电离成离子,插入离子选择性电极(指示电极)作为电池的正极,参比电极作为电池的负极,形成原电池,在相关的离子选择性电极和参比电极之间形成电位差,即电池的电动势。
- 项目:主要测量项目有K+、+Na+、Cl−等。
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