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在wb制胶的过程中,相信有很多同学经常遇到这样的疑惑:WB胶10天了还可以用吗?今天就以上问题做一个简短分享。
1WB提前配胶优点:可以批量配,配一次,跑几天,方便,省时省事,特别是在需要同时处理多个样品或进行复杂实验步骤时。。
缺点:保存不当可能导至干胶,电泳速度变慢或条带扭曲等情况。凝胶在配制后,其成分(过硫酸铵、TEMED )会逐渐分解,导至凝胶的聚合度和硬度发生变化(胶的密度改变),影响电泳效果。长时间储存的凝胶可能更容易出现裂纹、塌陷。
使用建议:提前配胶备用的话,可将充分凝固的胶放在去离子水或电泳液中完全浸没,置于4℃冰箱中保存,推荐在3天内使用;超过3天后用,条带确实不好看。
2现配现用
优点:稳定,无需担心胶还能不能用的问题,聚合度和硬度最为理想,有利于获得高质量的电泳结果。
缺点:费时费事,另外如果着急的时候,没有等够时间,未充分凝固,特别是气温较低的时候,凝胶凝固的速度会特别慢,会造成胶孔不平或有絮状物影响上样。
总之,在操作得当的情况下,在3天内使用两种方式其实没有太大差别。但如果是在对实验结果要求较高的研究中,现配现用通常是更为推荐的做法。另外每个实验室环境、使用的试剂均有所不同,具体的方式可根据实际情况进行调整。 |
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