一、荧光定量PCR仪的发展史 最早的PCR是以3个不同温度的水浴锅为基础，是水浴锅加机械臂，算不上真正的PCR仪。 1987年PerKin Elmer-Cetus仪器公司，推出世界上第1台PCR仪，到1986年Higuchi在普通PCR仪的基础上，再配上一个激发和检测装置，第一台实时定量PCR仪就诞生了。 真正市场化的荧光PCR仪，是美国ABI公司1996年推出的7700，在1997年引入国内，放置在卫生部临检中心。 自此各种各样荧光PCR仪涌入市场，极大地促进了PCR技术在生命科学研究和临床分子诊断中的应用。
二、荧光定量PCR的工作原理 所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 通过荧光定量PCR仪的热循环系统的升降温变化，使得核酸片段得以复制，仪器光学系统采集伴随核酸扩增产生的荧光信号，并对荧光信号进行分析转化、数学运算后，得到扩增曲线。
三、仪器组成： 光学系统：激发光源和检测系统； 热循环系统：加热和制冷系统； 信号处理系统；
激发光源的选择： 由于荧光物质的强度与激发光的强度成正比，因此，作为理想的激发光源应具备 ①足够的强度 ②在所需光谱范围内有连续的光谱 ③其强度与波长无关，即光源的输出应是连续平滑等强度的辐射 ④光强稳定。 事实上，符合这些要求的光源实际上并不存在，这就需要选择合适的或是最佳的激发光源。
检测系统： 荧光分析技术需要将光信号转化为电信号，测量的是光功率的大小，同时需要进行电信号的处理。光电探测器用于将荧光信号转换为电信号。定量仪荧光检测系统在仪器尺寸、可靠性、环境适应性、光谱速度、操作方便性等诸多方面对光电探测器有较高要求。 目前较常用的光电检测器主要有以下几类： 光电二极管：光电二极管和普通二极管一样，也是由一个结组成的半导体器件，也具有单方向导电特性。光电二极管在设计和制作时尽量使结的面积相对较大，以便接收入射光。 CCD：Charge Coupled Device (CCD)是一种新型光电转换器件，学名是电荷祸合器件，它能存储由光产生的信号电荷。当对它施加特定时序的脉冲时，其存储的信号电荷便可在CCD内作定向传输而实现自扫描。 光电倍增管：光电倍增管是依据光电子发射、二次电子发射和电子光学的原理制成的、透明真空壳体内装有特殊电极的器件。
加热系统：空气循环加热以及变温金属块加热2种。 空气循环加热： 优点： ①无需金属的精密加工可以使成本降低； ②整个系统不采用制冷液，没有液体流动，安全性高，同时以测定管内温度为控温依据，显示温度真实可靠； ③由于是一个温室，空气与反应管紧密直接接触，不同扩增管间的温度均一性好。 缺点： ①对环境温度要求高：不能低于室温（15 - 35℃）; ②空气通常导热性差，比热小，为解决这一问题，利用离心产生空气流动，这样就影响标本量，使得标本量小。 ③使用毛细管作为扩增反应管，吸附现象大，因此试剂的通用性差，需针对其建立专门的实验参数。
变温金属块加热：金属热块的加热和降温分别通过电阻丝和半导体来控制。 优点： ①温控范围大（4℃ to 99℃） ，均一性（＜±0.5 ℃） ②灵活性好：可以做温度梯度 ③样本数量多（96孔和384孔)； 缺点：其加热速度比空气加热稍慢
常用荧光定量PCR仪： （1）ABI7500：7500是ABI第三代PCR产品，目前ABI市场占有率最高，最成功PCR仪。价格40万RMB， 检测孔数：兼容96孔和8联管。 检测通道：5通道，除去ROX后4通道。 加热模块：半导体加热模块，升温3℃/S 激发光源：齿钨灯。
（2）Roche-LightCycler 480 检测通道：6通道 加热模式：半导体加热制冷模块 升温：5℃/S 孔数：96孔（10-100ul）检测1小时,384孔（5-20ul）检测40min 材料：专用板， 集多个优点于一身，目前市面上最强悍的PCR仪
（3）Bio-Rad-CFX96 检测孔数：96孔板 激发光源：6色LED 加热模块：其基座为半导体加热模块，反应模块为专利蜂巢设计，升温5℃/S，温控准确性好。 运行时间：55min完成40个循环。 检测通道：5通道，PMT扫描机制，无需ROX校正 可以脱离电脑控制，独立运行 具有温度梯度功能
（4）上海宏石SLAN 采用LED+PMT检测模式，升温3℃/S 半导体加热模块 具有单通道，双通道，三通道三种检测模式 支持48孔模式，耗材为0.2mlPCR管 在病原体的临床检测，食品卫生检测方面应用比较不错。
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