纯化柱你了解多少？

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纯化柱你了解多少？
核酸纯化是分子生物学的基础，纯化产物的质量直接影响后续实验的最终结果，想必每一个出入实验室的科研人都曾经历过核酸提取和纯化的各种挑战，核酸提取纯化的方法也多种多样，离心柱法凭借方便、快捷、产物质量高的优势成为目前实验室最普遍使用的方法，我想每个实验室多多少少都会有那么集合试剂盒吧。
每种试剂盒都会看到一个小东西，这个东西是决定产物质量的关键——纯化柱。说到核酸提取你可能并不陌生，但是纯化柱你了解多少呢？知道他的工作原理是什么？和其他的提取方法对比，离心柱法的优势又有哪些？


纯化柱由离心管+硅胶膜+纯化柱组成，起到主要作用的是中间的硅胶膜，硅胶膜可以选择性的吸附核酸，而且这个过程是可逆的。
大多数离心柱中吸附核酸的是硅胶膜，实际上就是一层玻璃纤维，其表面有大量修饰的硅羟基（Si-OH），硅羟基在溶液中解离后带负电荷，然后与带正电盐离子、带负电DNA形成电桥，从而吸附住DNA，使得DNA双链遍单链，不会被生物大分子溶剂洗脱，但能经水溶性缓冲液水化后，被定量回收，从而实现纯化分离。


硅胶膜在高盐（如4M盐酸胍）低PH（如PH5.0-6.5）会选择性吸附DNA/RNA。
硅胶膜在低盐浓度高PH（如PH8.0）会释放DNA，RNA。可以利用硅胶膜的这个特性，达到纯化DNA/RNA的目的。
和有机法相比，离心柱法更加便捷，高效，通常320分钟内可以完成纯化。其纯化产物的得率也会高于有机法。更重要的是通过对试剂盒缓冲液及吸附膜的优化，离心柱法更能应对多种样本类型，例如：血液，培养液，植物，拭子，病毒，细菌等。针对不同应用，可以纯化某一类特定的核酸，例如质粒，mRNA，MicroRNA等。
和磁珠法相比，离心柱法的通量更加灵活，不需要配套仪器。让高质量的核酸纯化，以高性价比的方法进入每一个分子生物学实验室。

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